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学生さんがライゲーションできないというので、試しに自分でやってみることにしました。久しぶりにピペッティングしました。 ライゲーションがうまくいかない要因はいくつかありますが、今回の原因は @ 入り難い構造をとる、A 形質転換がうまくいってない、B 腕が悪い、のどれかであると判断したので、取り合えず自分が手を動かすことにしました。話を聞いていると、自作のコンピーテントセルの形質転換効率をチェックしていないということで、Aが原因であることも十分考えられます。明日コロニーが得られれば、言いたくはないですが、Bの可能性が高い、と言えます。もし何も生えてこなければ、@かAでしょう。コンピの形質転換効率を調べておくように言っておきましたので、それを見て、@かAか判断が出来るはずです。何はともあれ、ライゲーションは研究の鬼門になる場合も多いので、じっくり原因を考えて今後の研究に生かせてもらいたいものです。 |
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